LPS对大鼠肾血管球内皮细胞通透性及骨架蛋白的影响

支琳琳¹ 马晓春¹
中国医科大学附属第一医院

目的　研究不同浓度LPS对大鼠肾血管球内皮细胞（RGECs）单层通透性及细胞骨架的影响。
方法　体外分离培养大鼠RGECs，鉴定后随机分为4组（LPS 0、2.5、5、10μg/ml）；采用单层细胞对白蛋白体外通透性实验测定内皮细胞通透性；采用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR) 检测血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）mRNA；采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测VEGF、VEGFR2蛋白；采用FITC-Phalloidin标记细胞纤维状肌动蛋白（F-actin）并在激光扫描共聚焦显微镜下观察细胞骨架变化。
结果　与对照组相比，LPS诱导内皮细胞对白蛋白的通透性明显增加( P < 0. 05)；LPS使内皮细胞高表达VEGF、VEGFR2mRNA及蛋白且存在浓度-效应趋势；内皮细胞VEGF、VEGFR2蛋白表达与单层细胞通透白蛋白水平呈正相关（r₁=0.849, r₂=0.876，P < 0.05）；对照组内皮细胞F-actin主要分布于细胞膜侧，形成致密有序的周围束状带；低浓度LPS作用下，外周致密带逐渐断裂、甚至消散；高浓度LPS作用下，外周致密带明显断裂，F-actin发生解聚。
结论 LPS可以使内皮细胞过分表达VEGF及VEGFR2，并且重构内皮细胞骨架F-actin使内皮细胞通透性增加。