hTERT基因转染人表皮干细胞对细胞周期的影响
王联群1 刘德伍1 蓝蔚1 林尊文1 黄培信1
南昌大学第一附属医院
目的 观察外源性人端粒酶逆转录酶﹙human telomerase reverse transcriptase，hTERT﹚基因转染对体外培养的人表皮干细胞细胞周期的影响。
方法 采用脂质体转染法，将质粒pIRES2- EGFP- hTERT转入体外培养的人表皮干细胞，并用G418筛选法进行抗性克隆的筛选与培养。应用反转录﹙RT﹚- PCR 法和Western blot法检测hTERT mRNA及其蛋白的表达，流式细胞仪检测细胞周期。
结果 转染组hTERT mRNA及其蛋白的表达强于非转染组。与非转染组比较，转染组G0/G1期细胞比例明显下降，而S、G2/M期细胞比例升高，增殖指数增加。
结论 hTERT 基因转染体外培养的人表皮干细胞能够增强hTERT基因的表达，细胞增殖能力明显增强。
方法 采用脂质体转染法，将质粒pIRES2- EGFP- hTERT转入体外培养的人表皮干细胞，并用G418筛选法进行抗性克隆的筛选与培养。应用反转录﹙RT﹚- PCR 法和Western blot法检测hTERT mRNA及其蛋白的表达，流式细胞仪检测细胞周期。
结果 转染组hTERT mRNA及其蛋白的表达强于非转染组。与非转染组比较，转染组G0/G1期细胞比例明显下降，而S、G2/M期细胞比例升高，增殖指数增加。
结论 hTERT 基因转染体外培养的人表皮干细胞能够增强hTERT基因的表达，细胞增殖能力明显增强。
