烟酸对胆固醇逆转运影响及机制研究
董静1
湖南省肿瘤医院重症医学科
目的 测定烟酸作用后巨噬细胞体内、体外胆固醇逆转运（RCT）的效率，并深入探讨其机制，从而了解烟酸对胆固醇逆转运的影响。
方法 以烟酸（0、1%，w/w）干预4周的C57BL/6J小鼠为模型，分别腹腔注射经已酰化低密度脂蛋白（Ac-LDL）荷脂与3H-胆固醇标记的巨噬细胞悬液，用液闪计数仪测定血清、肝脏、粪便中3H-胆固醇的含量；以不同剂量（0、0.2、1.0、5.0mM）烟酸干预巨噬细胞，HDL介导，测定细胞胆固醇流出；以RT-PCR方法检测肝组织CYP7α，肝脏和小肠ABCG5、LXRα，巨噬细胞SR-BI、ABCA1、ABCG1、LXRα、PPARγ的转录水平表达；再用Western-blot方法检测肝脏和小肠的ABCG5、LXRα，巨噬细胞ABCG1、LXRα的蛋白水平表达。
结果 1.烟酸明显降低小鼠血清总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C），轻度降低血清甘油三酯（TG）；升高高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）。2. 与对照组比较，烟酸组小鼠血清中3H-胆固醇的分布降低，而肝脏及粪便中3H含量却明显增多。3. 烟酸分别增加肝脏和小肠组织中ABCG5 mRNA表达，上调CYP7α的表达，分别增加肝脏和小肠LXRα mRNA的表达。4. 对照组肝脏ABCG5和LXRα的蛋白质水平基本没有表达，但烟酸干预后两种组织的ABCG5和LXRα蛋白表达明显增强。5. 烟酸可呈浓度依赖性增加巨噬细胞中HDL介导的胆固醇流出。6. SR-BI在巨噬细胞中有较高表达，但与对照组比较，烟酸浓度的升高对SR-BI表达的影响无显著性差异。7. 烟酸呈浓度依赖性增加ABCA1、ABCG1、LXRα和PPARγmRNA的表达。8. 巨噬细胞ABCG1和LXRα蛋白表达与烟酸的浓度呈剂量依赖性增加。
结论 1. 烟酸降低小鼠血清TC、LDL-C、TG，升高HDL-C。2. 烟酸促进小鼠体内巨噬细胞胆固醇逆转运。3. 烟酸可能通过上调体内LXRα，从而刺激ABCG5、CYP7α表达来发挥促进小鼠体内胆固醇逆转运作用。4. 烟酸可剂量依赖性促进由ABCA1和ABCG1介导的巨噬细胞胆固醇外流，可能与其上调PPARγ和LXRα表达有关。5.烟酸促进巨噬细胞胆固醇流出机制可能与细胞膜SR-BI的表达量无关。
方法 以烟酸（0、1%，w/w）干预4周的C57BL/6J小鼠为模型，分别腹腔注射经已酰化低密度脂蛋白（Ac-LDL）荷脂与3H-胆固醇标记的巨噬细胞悬液，用液闪计数仪测定血清、肝脏、粪便中3H-胆固醇的含量；以不同剂量（0、0.2、1.0、5.0mM）烟酸干预巨噬细胞，HDL介导，测定细胞胆固醇流出；以RT-PCR方法检测肝组织CYP7α，肝脏和小肠ABCG5、LXRα，巨噬细胞SR-BI、ABCA1、ABCG1、LXRα、PPARγ的转录水平表达；再用Western-blot方法检测肝脏和小肠的ABCG5、LXRα，巨噬细胞ABCG1、LXRα的蛋白水平表达。
结果 1.烟酸明显降低小鼠血清总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C），轻度降低血清甘油三酯（TG）；升高高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）。2. 与对照组比较，烟酸组小鼠血清中3H-胆固醇的分布降低，而肝脏及粪便中3H含量却明显增多。3. 烟酸分别增加肝脏和小肠组织中ABCG5 mRNA表达，上调CYP7α的表达，分别增加肝脏和小肠LXRα mRNA的表达。4. 对照组肝脏ABCG5和LXRα的蛋白质水平基本没有表达，但烟酸干预后两种组织的ABCG5和LXRα蛋白表达明显增强。5. 烟酸可呈浓度依赖性增加巨噬细胞中HDL介导的胆固醇流出。6. SR-BI在巨噬细胞中有较高表达，但与对照组比较，烟酸浓度的升高对SR-BI表达的影响无显著性差异。7. 烟酸呈浓度依赖性增加ABCA1、ABCG1、LXRα和PPARγmRNA的表达。8. 巨噬细胞ABCG1和LXRα蛋白表达与烟酸的浓度呈剂量依赖性增加。
结论 1. 烟酸降低小鼠血清TC、LDL-C、TG，升高HDL-C。2. 烟酸促进小鼠体内巨噬细胞胆固醇逆转运。3. 烟酸可能通过上调体内LXRα，从而刺激ABCG5、CYP7α表达来发挥促进小鼠体内胆固醇逆转运作用。4. 烟酸可剂量依赖性促进由ABCA1和ABCG1介导的巨噬细胞胆固醇外流，可能与其上调PPARγ和LXRα表达有关。5.烟酸促进巨噬细胞胆固醇流出机制可能与细胞膜SR-BI的表达量无关。
