骨保护素对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

罗琼1 符晖1 刘江华1
南华大学附属第一医院ICU

目的 研究骨保护素(OPG)对体外高糖环境中培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECS )凋亡的影响,并探讨OPG的保护效应是否与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(即TRAIL)途径有关。
方法 以体外培养的人脐静脉内皮细胞株为对象,研究了OPG对高糖诱导的内皮
细胞凋亡的影响及其机制。实验分为正常对照组、无血清处理组、无血清+高糖
(Glu 25mmol/L)处理组、无血清+高糖+OPG(1.0μg/ml)处理组、无血清+高
糖+OPG(1.0μg/ml)+anti-TRAIL(100ng/ml)处理组及无血清+高糖+OPG(1.0
μg/ml)+TRAIL(200ng/ml)处理组。以上各组经24小时处理后,应用(AO/EB)
染色法及流式细胞术检测细胞凋亡。
结果 1. OPG对高糖诱导的内皮细胞凋亡影响       
 1.1 AO/EB双染法显示:无血清+高糖处理组凋亡细胞比例明显增加;与无血清+高糖处理组相比较,无血清+高糖+OPG处理组凋亡细胞比例明显减少;与无血清+高糖+OPG处理组相比较,无血清+高糖+OPG+anti-TRAIL处理组凋亡细胞比例则进一步明显减少,而无血清+高糖+OPG+TRAIL处理组凋亡细胞比例却显著增加。
 1.2 FCM结果显示:与无血清处理组相比较,无血清+高糖处理组内皮细胞凋亡率明显增加(31.30±1.76% VS 16.85±1.48%,p<0.05);与无血清+高糖处理组相比较,无血清+高糖+OPG处理组内皮细胞凋亡率明显减少(22.02±0.41% VS31.30±1.76%,p<0.05);与无血清+高糖+OPG处理组相比较,无血清+高糖+OPG+anti-TRAIL处理组内皮细胞凋亡率进一步明显减少(14.18±1.74% VS22.02±0.41%,p<0.05),而无血清+高糖+OPG+TRAIL处理组内皮细胞凋亡率却显著增加(35.59±3.08% VS 22.02±0.41%,p<0.05)。
结论 1.OPG可抑制高糖诱导的内皮细胞的凋亡,其保护效应可能与TRAIL途径相关。