头孢曲松压力下耐药基因SHV-18在脓毒症大鼠肠道内的传播
刘绍泽1 陈险峰2 陈德昌1 杨兴易1
1. 第二军医大学第二附属医院急救科, 2. 第二军医大学第二附属医院检验科微生物室
目的 观察头孢曲松压力下烫伤及脓毒症大鼠肠道定植的外源性耐药菌－肺炎克雷伯标准菌株（ATCC700603）变化规律及其携带的耐药基因SHV－18在肠道内的传播。
方法 32只健康SD大鼠随机分为烫伤组和脓毒症组，烫伤及脓毒症组各细分为生理盐水治疗组及头孢曲松治疗组，每组8只。采用大鼠背部烫伤模型，烫伤后24h给予内毒素（10mg/kg）进行“二次打击”。分别于烫伤及内毒素 “二次打击”2h后给予肺炎克雷伯杆菌菌株（ATCC700603）菌液1ml（1×108cfu/ml）灌胃，各组均在菌液灌胃24h后给予头孢曲松或生理盐水治疗，疗程9天。无菌条件下收集各组大鼠建模前、菌液灌胃24h、治疗1天、3天、6天、9天及停药2天、1周、2周、3周、4周时相新鲜粪粒行肺炎克雷伯杆菌及肠道原籍菌－大肠杆菌定量培养，纸片法检测其药物敏感性，并用PCR法测定耐药基因SHV－18。
结果 烫伤、脓毒症大鼠肠道定植的肺炎克雷伯标准菌株在定植后1-3天其数量逐渐减少并最终被清除；头孢曲松治疗后，烫伤及脓毒症大鼠肠道内定植菌持续存在于肠道中，停药后清除缓慢；脓毒症组大鼠治疗过程中查见了肺炎克雷伯杆菌菌株对头孢曲松耐药性变化；未应用头孢曲松（生理盐水治疗组）的烫伤及脓毒症外源菌定植大鼠粪便中大肠杆菌均未见有耐药性改变；烫伤及脓毒症大鼠菌液灌胃24h后给予头孢曲松治疗1天其粪便中大肠杆菌数量即急剧减少，直至停用头孢曲松1周后，烫伤及脓毒症组大鼠肠道原籍大肠杆菌基本恢复。脓毒症头孢曲松治疗组5只大鼠（共8只）分别于治疗9天（4只）和停药2周（1只）时粪便中检测到的大肠杆菌获得了定植菌的SHV-18耐药基因，转变为产ESBLs菌株。
结论 在广谱抗生素压力下，脓毒症大鼠肠道微生态环境遭到破坏，定植耐药菌失去肠道原籍菌的定植抗力，同时发生了抗生素的诱导耐药而存在于肠道中，不易被机体清除，并进而将耐药基因传递给肠道原籍菌，耐药基因得以伴随肠道原籍菌而存在于肠道中，形成持久的潜在危害。
方法 32只健康SD大鼠随机分为烫伤组和脓毒症组，烫伤及脓毒症组各细分为生理盐水治疗组及头孢曲松治疗组，每组8只。采用大鼠背部烫伤模型，烫伤后24h给予内毒素（10mg/kg）进行“二次打击”。分别于烫伤及内毒素 “二次打击”2h后给予肺炎克雷伯杆菌菌株（ATCC700603）菌液1ml（1×108cfu/ml）灌胃，各组均在菌液灌胃24h后给予头孢曲松或生理盐水治疗，疗程9天。无菌条件下收集各组大鼠建模前、菌液灌胃24h、治疗1天、3天、6天、9天及停药2天、1周、2周、3周、4周时相新鲜粪粒行肺炎克雷伯杆菌及肠道原籍菌－大肠杆菌定量培养，纸片法检测其药物敏感性，并用PCR法测定耐药基因SHV－18。
结果 烫伤、脓毒症大鼠肠道定植的肺炎克雷伯标准菌株在定植后1-3天其数量逐渐减少并最终被清除；头孢曲松治疗后，烫伤及脓毒症大鼠肠道内定植菌持续存在于肠道中，停药后清除缓慢；脓毒症组大鼠治疗过程中查见了肺炎克雷伯杆菌菌株对头孢曲松耐药性变化；未应用头孢曲松（生理盐水治疗组）的烫伤及脓毒症外源菌定植大鼠粪便中大肠杆菌均未见有耐药性改变；烫伤及脓毒症大鼠菌液灌胃24h后给予头孢曲松治疗1天其粪便中大肠杆菌数量即急剧减少，直至停用头孢曲松1周后，烫伤及脓毒症组大鼠肠道原籍大肠杆菌基本恢复。脓毒症头孢曲松治疗组5只大鼠（共8只）分别于治疗9天（4只）和停药2周（1只）时粪便中检测到的大肠杆菌获得了定植菌的SHV-18耐药基因，转变为产ESBLs菌株。
结论 在广谱抗生素压力下，脓毒症大鼠肠道微生态环境遭到破坏，定植耐药菌失去肠道原籍菌的定植抗力，同时发生了抗生素的诱导耐药而存在于肠道中，不易被机体清除，并进而将耐药基因传递给肠道原籍菌，耐药基因得以伴随肠道原籍菌而存在于肠道中，形成持久的潜在危害。
