碳青酶烯类抗生素对脓毒症大鼠肠道菌群及其易位的影响
刘绍泽1 陈德昌1 杨兴易1 马丽琼1
上海长征医院
目的 探讨碳青酶烯类广谱抗生素对脓毒症大鼠肠道菌群及其易位的影响。
方法 59只健康SD大鼠随机分为对照组，烫伤组、和脓毒症组；烫伤组及脓毒症组根据亚安培南治疗时间细分为治疗0日组（即烫伤或脓毒症对照组）、治疗3日组及治疗9日组。采用大鼠背部烫伤模型，烫伤后24h分两次给予内毒素（20mg/kg）进行“二次打击”。“二次打击”24h后给予亚安培南（120mg/kg）腹腔注射治疗，在相应时相点分别取结肠内容物行常见致病杆菌、肠球菌定量培养、菌种鉴定，取肠系膜淋巴结、肝、肺组织和血液行细菌培养了解广谱抗生素压力下肠道细菌易位规律，并对分纯菌株进行药物敏感性检验。
结果 大肠杆菌和粪肠球菌为肠道原籍优势菌，单纯烫伤对肠道菌群及细菌易位无明显影响。内毒素 “二次打击”后，肠道杆菌及肠球菌数量分别增加上千倍及上百倍（P<0.01），优势菌仍为大肠杆菌和粪肠球菌；各实质脏器及血液细菌易位增加，易位细菌全部为肠道杆菌，并以过路条件致病杆菌如肺炎克雷伯杆菌、变形杆菌、铜绿假单孢菌等易位多见。烫伤大鼠给予亚安培南治疗后，结肠内粪肠球菌、屎肠球菌及过路条件致病杆菌显著增加（P均 < 0.01），后者随抗生素应用时限的延长进一步增多（P < 0.05），屎肠球菌的数量超过了粪肠球菌成为结肠内优势球菌；亚安培南治疗9日组烫伤大鼠细菌易位明显增多（P < 0.05），易位细菌以屎肠球菌多见。脓毒症大鼠给予亚安培南治疗后，原籍优势杆菌－大肠杆菌数量明显减少（P < 0.01）致肠杆菌总数减少，但同时过路条件致病杆菌激增（P < 0.01）；而粪肠球菌和屎肠球菌在原二次打击基础上数量进一步增多（P < 0.01），远超过肠道杆菌，屎肠球菌取代粪肠球菌成为肠道优势球菌；同时细菌易位进一步增加，易位细菌由肠杆菌演变为屎肠球菌，具有明显的规律性。亚安培南治疗后的烫伤和脓毒症大鼠肠道内耐药菌株增多，分别检测到ESBLs (+)的肺炎克雷伯杆菌、变形杆菌及耐亚安培南的铜绿假单孢菌；在亚安培南治疗前后均检测到耐万古霉素的粪肠球菌。
结论 碳青酶烯类广谱抗生素可明显影响肠道正常菌群，破坏肠道微生态环境，将携带耐药基因的肺炎克雷伯杆菌、变形杆菌、粪肠球菌及屎肠球菌等条件致病菌选择为肠道优势菌群，加剧肠道细菌易位，导致肠源性感染，使肠道成为耐药菌株向全身器官播散的重要平台。
方法 59只健康SD大鼠随机分为对照组，烫伤组、和脓毒症组；烫伤组及脓毒症组根据亚安培南治疗时间细分为治疗0日组（即烫伤或脓毒症对照组）、治疗3日组及治疗9日组。采用大鼠背部烫伤模型，烫伤后24h分两次给予内毒素（20mg/kg）进行“二次打击”。“二次打击”24h后给予亚安培南（120mg/kg）腹腔注射治疗，在相应时相点分别取结肠内容物行常见致病杆菌、肠球菌定量培养、菌种鉴定，取肠系膜淋巴结、肝、肺组织和血液行细菌培养了解广谱抗生素压力下肠道细菌易位规律，并对分纯菌株进行药物敏感性检验。
结果 大肠杆菌和粪肠球菌为肠道原籍优势菌，单纯烫伤对肠道菌群及细菌易位无明显影响。内毒素 “二次打击”后，肠道杆菌及肠球菌数量分别增加上千倍及上百倍（P<0.01），优势菌仍为大肠杆菌和粪肠球菌；各实质脏器及血液细菌易位增加，易位细菌全部为肠道杆菌，并以过路条件致病杆菌如肺炎克雷伯杆菌、变形杆菌、铜绿假单孢菌等易位多见。烫伤大鼠给予亚安培南治疗后，结肠内粪肠球菌、屎肠球菌及过路条件致病杆菌显著增加（P均 < 0.01），后者随抗生素应用时限的延长进一步增多（P < 0.05），屎肠球菌的数量超过了粪肠球菌成为结肠内优势球菌；亚安培南治疗9日组烫伤大鼠细菌易位明显增多（P < 0.05），易位细菌以屎肠球菌多见。脓毒症大鼠给予亚安培南治疗后，原籍优势杆菌－大肠杆菌数量明显减少（P < 0.01）致肠杆菌总数减少，但同时过路条件致病杆菌激增（P < 0.01）；而粪肠球菌和屎肠球菌在原二次打击基础上数量进一步增多（P < 0.01），远超过肠道杆菌，屎肠球菌取代粪肠球菌成为肠道优势球菌；同时细菌易位进一步增加，易位细菌由肠杆菌演变为屎肠球菌，具有明显的规律性。亚安培南治疗后的烫伤和脓毒症大鼠肠道内耐药菌株增多，分别检测到ESBLs (+)的肺炎克雷伯杆菌、变形杆菌及耐亚安培南的铜绿假单孢菌；在亚安培南治疗前后均检测到耐万古霉素的粪肠球菌。
结论 碳青酶烯类广谱抗生素可明显影响肠道正常菌群，破坏肠道微生态环境，将携带耐药基因的肺炎克雷伯杆菌、变形杆菌、粪肠球菌及屎肠球菌等条件致病菌选择为肠道优势菌群，加剧肠道细菌易位，导致肠源性感染，使肠道成为耐药菌株向全身器官播散的重要平台。
