CD4+CD25+调节性T细胞转录因子Foxp3转染对哮喘小鼠脾淋巴细胞功能的影响

李茜¹ 沈华浩² 孙仁华¹
1. 浙江省人民医院 ICU, 2. 浙江大学医学院附属第二医院 呼吸科

【摘要】目的：转染Foxp3至哮喘小鼠脾淋巴细胞，探讨Foxp3表达对脾淋巴细胞功能的影响。方法：OVA致敏激发制作哮喘小鼠模型，收集培养脾脏淋巴细胞；使用电穿孔法转染真核表达载体pcDNA3.1(-)-Foxp3至脾脏淋巴细胞，并设转染空质粒组和对照组；RT-PCR和Western Blot检测Foxp3的表达；流式细胞术检测转染后CD4⁺CD25⁺ Treg细胞/CD4⁺细胞比例；MTT法检测转染后的脾脏淋巴细胞增殖反应，ELISA检测脾淋巴细胞上清中IL-4、IFN-γ的含量。结果：转染组Foxp3 mRNA 和蛋白的表达水平显著高于空质粒组和对照组；转染Foxp3后CD4+CD25+ Treg细胞/CD4+细胞比例显著高于空质粒组和对照组；与空质粒组和对照组相比，转染pcDNA3.1(-)-Foxp3质粒明显抑制了脾淋巴细胞增殖；转染组细胞上清中IL-4、IFN-γ含量低于空质粒和对照组。结论：转染pcDNA3.1(-)-Foxp3至哮喘小鼠脾淋巴细胞，Foxp3得到有效表达。Foxp3的高表达能增加CD4+CD25+ T细胞的数量，抑制哮喘小鼠脾淋巴细胞的增殖和Th1和Th2细胞因子。