以人骨髓干细胞诱导构建人工肝生物反应器的实验研究

朱章华1
南京大学医学院附属鼓楼医院

  

 

 

目的:探索在中空纤维滤器内扩增人骨髓间充质干细胞并诱导其向肝细胞样细胞分化构建生物人工肝反应器的可行性。方法:采用直接hBMMNC种植培养,以2.5×103/cm2浓度传代,采用含EGFPDGF-BB的培养液,在培养瓶内部分扩增后,种植入中空纤维滤器内继续扩增一阶段后,改用含HGFFGF-4OSM20ng/mL的培养液进行诱导培养,检测诱导后白蛋白、甲胎蛋白的合成、氨和安定的代谢、尿素合成功能情况。结果:骨髓间充质干细胞在滤器内生长良好;经诱导后6天出现甲胎蛋白分泌,9天分泌白蛋白,并出现明显的氨代谢及尿素合成功能,12天出现明显的安定代谢,18天左右蛋白及尿素合成及氨与安定代谢处于相对较高水平。结论:扩增后的骨髓间充质干细胞能在中空纤维滤器内生长良好并可经相应诱导体系诱导成为具有分泌白蛋白、甲胎蛋白、合成尿素、代谢氨的肝细胞样细胞,理论上可用于构建生物人工肝。