铜绿假单胞菌急性肺损伤的蛋白质差异表达

刘冬冬¹ 毛璞¹ 黎毅敏¹
广州医学院第一附属医院

目的 利用蛋白质组学方法筛选铜绿假单胞菌急性肺损伤特异相关蛋白质，为鉴别诊断感染与非感染因素引起的急性肺损伤提供理论依据。
方法建立感染（铜绿假单胞菌急性肺损伤）与非感染（包括机械通气急性肺损伤、油酸急性肺损伤和空白对照）大鼠模型，应用双向凝胶电泳技术分离总蛋白，Image Master 2-DE软件分析差异表达蛋白质点后，应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱获取肽质量指纹图谱并通过NCBI数据库鉴定差异表达的蛋白质，最后Western-blot验证差异表达的蛋白质。
结果 双向凝胶电泳图谱中找到32个表达量有明显差异的蛋白质点，质谱鉴定出18种蛋白质。其中的过氧化物氧化还原酶Ⅰ（PrxⅠ）、钙网蛋白等11种蛋白质在铜绿假单胞菌组表达上调，并在Western-blot验证了peroxiredoxin Ⅰ的上调，与凝胶电泳结果一致。谷胱甘肽-S-转移酶а4、转甲状腺素蛋白等7种蛋白在铜绿假单胞菌组表达下调。
结论 应用比较蛋白组学鉴定出18种差异蛋白,11种在铜绿假单胞菌组表达上调，7种表达下调，分别参与催化代谢、氧化还原、信号转导等调节。其中的PrxⅠ和钙网蛋白可能通过对氧化/抗氧化和免疫应答的调节在细菌感染性急性肺损伤中起着重要作用。