机械拉伸对γ－干扰素诱导肺泡上皮细胞人β－防御素－3表达的影响
桂平1 武庆平1 袁世荧1 姚尚龙1
华中科技大学同济医学院附属协和医院 麻醉与重症医学科
目的 研究机械拉伸对γ－干扰素（IFN-γ）诱导肺泡上皮细胞（A549 细胞）人β－防御素－3（HBD-3）表达的影响并探讨HBD-3在呼吸机相关性肺炎（VAP）发病机制中的作用。
方法 体外培养A549细胞，分别给予机械拉伸（S组），10 ng/ml IFN-γ（I组）和10 ng/ml IFN-γ＋机械拉伸（IS组）3种处理，未处理的细胞为对照组（C组），处理的时间为2 h，4 h和6 h。拉伸由细胞Flexercell-4000TTM拉伸系统提供，拉伸的幅度为20﹪，速率为30次/分。处理后实时定量逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）检测HBD-3 mRNA的表达；处理6 h的细胞继续培养至24 h，激光扫描共聚焦显微镜检测HBD-3的表达。采用单因素方差分析和q检验对实验数据进行统计学分析。
结果 单独的机械拉伸不能使HBD-3 mRNA的表达发生显著变化。10 ng/ml IFN-γ处理2 h，4 h和6 h后，HBD-3 mRNA表达量较之C组分别增加了2.63±0.60，8.02±1.63和12.21±2.35倍。10 ng/ml IFN-γ＋机械拉伸处理2 h，4 h和6 h后，HBD-3 mRNA表达量较之C组分别增加了1.54±0.16，4.37±0.87和6.99±1.32倍，但均显著低于I组（P均<0.01）。6 h机械拉伸后，IS组HBD-3的表达显著少于I组（P<0.01），同C组没有显著差异。
结论 机械拉伸能显著抑制IFN-γ诱导肺泡上皮细胞HBD-3表达的上调，这可能是机械通气（MV）的病人易于发生VAP的原因之一。
国家自然科学基金资助项目（30571787，30930089）
