穿心莲内酯（AP）对人脐静脉内皮细胞粘附分子表达的影响及机制研究
杨鹏1 刘环芹1 李树生1
华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科
目的 探讨穿心莲内酯(andrographolide)对经氧化低密度脂蛋白（ox-LDL)损伤的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达粘附分子VCAM-1、ICAM-1、E-选择素以及CD40-CD40L的影响。
方法 于同济医院产科手术室在无菌条件下取健康新生儿脐带，采用胰酶消化法原代培养人脐静脉内皮细胞。采用形态学及免疫荧光Ⅷ因子相关抗原鉴定内皮细胞，取第3代细胞用于实验。实验共分5组，每组设2个复孔：（1）、空白对照组，给予无血清M199培养基培养24小时。（2）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL)损伤组。（3）、ox-LDL+AP50mg/L组。（4）ox-LDL+AP100mg/L组。（5）、ox-LDL+AP200mg/L组。先予无血清同步培养24小时，再加药物干预24小时；取上清、离心后用ELISA试剂盒分别检测ICAM-1、VCAM-1、E-选择素蛋白浓度；采用胰酶消化法收集细胞，应用流式细胞术直接免疫荧光标记法检测内皮细胞表面抗原CD40/CD40L的表达。
结果 与对照组相比，ox-LDL组可促进粘附分子VCAM-1、 ICAM-1、E-选择素蛋白及CD40、CD40L的表达，P<0.01；与ox-LDL组相比，低浓度的穿心莲内酯（50mg/L）对粘附分子VCAM-1、 ICAM-1、E-选择素蛋白及CD40、CD40L的表达无明显影响，P>0.05；而中、高浓度的穿心莲内酯（100mg/L、200mg/L）对粘附分子VCAM-1、 ICAM-1、E-选择素蛋白及CD40、CD40L的表达有显著性抑制作用，P<0.01，其中高浓度的穿心莲内酯比中浓度的穿心莲内酯效果更显著，P<0.01；且粘附分子VCAM-1、 ICAM-1、E-选择素蛋白的表达与CD40/CD40L的表达呈正相关，相关指数R>0.7。
结论 中等以上浓度的穿心莲内酯具有抑制内皮细胞表达粘附分子VCAM-1、 ICAM-1、E-选择素蛋白的作用，其作用机制可能是通过抑制CD40-CD40L信号系统完成的。
方法 于同济医院产科手术室在无菌条件下取健康新生儿脐带，采用胰酶消化法原代培养人脐静脉内皮细胞。采用形态学及免疫荧光Ⅷ因子相关抗原鉴定内皮细胞，取第3代细胞用于实验。实验共分5组，每组设2个复孔：（1）、空白对照组，给予无血清M199培养基培养24小时。（2）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL)损伤组。（3）、ox-LDL+AP50mg/L组。（4）ox-LDL+AP100mg/L组。（5）、ox-LDL+AP200mg/L组。先予无血清同步培养24小时，再加药物干预24小时；取上清、离心后用ELISA试剂盒分别检测ICAM-1、VCAM-1、E-选择素蛋白浓度；采用胰酶消化法收集细胞，应用流式细胞术直接免疫荧光标记法检测内皮细胞表面抗原CD40/CD40L的表达。
结果 与对照组相比，ox-LDL组可促进粘附分子VCAM-1、 ICAM-1、E-选择素蛋白及CD40、CD40L的表达，P<0.01；与ox-LDL组相比，低浓度的穿心莲内酯（50mg/L）对粘附分子VCAM-1、 ICAM-1、E-选择素蛋白及CD40、CD40L的表达无明显影响，P>0.05；而中、高浓度的穿心莲内酯（100mg/L、200mg/L）对粘附分子VCAM-1、 ICAM-1、E-选择素蛋白及CD40、CD40L的表达有显著性抑制作用，P<0.01，其中高浓度的穿心莲内酯比中浓度的穿心莲内酯效果更显著，P<0.01；且粘附分子VCAM-1、 ICAM-1、E-选择素蛋白的表达与CD40/CD40L的表达呈正相关，相关指数R>0.7。
结论 中等以上浓度的穿心莲内酯具有抑制内皮细胞表达粘附分子VCAM-1、 ICAM-1、E-选择素蛋白的作用，其作用机制可能是通过抑制CD40-CD40L信号系统完成的。
