肝素对脂多糖诱导内皮细胞损伤中MMP-9及其抑制基因表达的影响
李旭1 张晓娟1 马晓春1
中国医科大学附属第一医院重症医学科
目的 探讨基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9, MMP-9)及其组织抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导内皮细胞损伤中的表达,并观察肝素对其水平的影响。
方法 LPS 10µg/ml刺激人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMEC)诱导损伤,肝素治疗组提前15分钟分别加入0.1U/ml及1U/ml普通肝素,正常对照组加入等量磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline,PBS)。分别在刺激2,6,12小时收集细胞提取RNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组细胞中MMP-9及TIMP-1的mRNA水平变化。
结果 与正常对照组比较,LPS刺激组MMP-9和TIMP-1的mRNA水平增高,12小时达到高峰,以TIMP-1增高明显,预防性应用肝素降低两者的基因表达,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论 LPS刺激下MMP-9,TIMP-1表达增加,肝素可能通过调节MMP-9、TIMP-1的水平发挥保护作用。
方法 LPS 10µg/ml刺激人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cells,HPMEC)诱导损伤,肝素治疗组提前15分钟分别加入0.1U/ml及1U/ml普通肝素,正常对照组加入等量磷酸盐缓冲液(phosphate-buffered saline,PBS)。分别在刺激2,6,12小时收集细胞提取RNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组细胞中MMP-9及TIMP-1的mRNA水平变化。
结果 与正常对照组比较,LPS刺激组MMP-9和TIMP-1的mRNA水平增高,12小时达到高峰,以TIMP-1增高明显,预防性应用肝素降低两者的基因表达,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论 LPS刺激下MMP-9,TIMP-1表达增加,肝素可能通过调节MMP-9、TIMP-1的水平发挥保护作用。