构建HMGB1基因真核细胞表达载体
张晓娟1 栾正刚1 马晓春1
中国医科大学附属第一医院重症医学科
目的 构建HMGB1基因真核细胞表达载体并检测其在人脐静脉内皮细胞中的表达。
方法 提取人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)mRNA，反转录为cDNA。PCR 扩增HMGB1全长编码基因，构建成pcDNA-3.1-myc-his-B-HMGB1真核细胞表达载体。转染HUVEC细胞，real time –PCR ,Western blot 检测转染后HMGB1基因的表达改变。
结果 real time –PCR 和Western blot方法检测转染HUVEC细胞后HMGB1基因的表达mRNA和蛋白的表达量与对照组相比明显增加。
结论 成功构建了HMGB1 全长基因真核细胞表达载体。
方法 提取人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)mRNA，反转录为cDNA。PCR 扩增HMGB1全长编码基因，构建成pcDNA-3.1-myc-his-B-HMGB1真核细胞表达载体。转染HUVEC细胞，real time –PCR ,Western blot 检测转染后HMGB1基因的表达改变。
结果 real time –PCR 和Western blot方法检测转染HUVEC细胞后HMGB1基因的表达mRNA和蛋白的表达量与对照组相比明显增加。
结论 成功构建了HMGB1 全长基因真核细胞表达载体。
