不同体积分数氧刺激早产鼠肺泡II型上皮细胞后对WNT信号通路表达的影响
李祝1 许峰1
重庆医科大学附属儿童医院
目的 探讨不同体积分数氧状态下，体外培养早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar type II epithelial cell, AECII)的生长变化以及对WNT信号通路表达的影响。
方法 原代培养早产鼠AECⅡ并用电镜鉴定；建立95% O2、40% O2和空气3种氧化损伤性细胞模型，各自暴露12H、24H和48H；四甲基偶氮唑盐反应比色法(MTT法)检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内活性氧（reactiveosygenspecies,ROS）浓度；RT-PCR检测WNT5a基因表达；Western-blot法检测细胞核中非磷酸化β-catenin蛋白的数量变化。
结果 与空气组相比，氧体积分数0.4组在12H、24H存活率和凋亡率均无统计学差异，但48H后出现统计学差异，ROS在12H升高不明显，超过24H有统计学差异；氧体积分数＞0.95组每组均和空气组有统计学差异。WNT信号通路表达在12H以氧体积分数＞0.95组明显；24H空气组和氧体积分数0.4组升高，以氧体积分数0.4组最显著，氧体积分数＞0.95组表达下降；48H空气组达到高峰，其余两组下降。
结论 随着氧化应激时间的延长，即使较低浓度的氧刺激（40%）在超过48H以后也会出现相应的氧化损伤；氧体积分数越高WNT信号通路激活越快，但随着氧化应激时间的延长，WNT信号通路表达下降也越迅速。
方法 原代培养早产鼠AECⅡ并用电镜鉴定；建立95% O2、40% O2和空气3种氧化损伤性细胞模型，各自暴露12H、24H和48H；四甲基偶氮唑盐反应比色法(MTT法)检测细胞存活率，流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内活性氧（reactiveosygenspecies,ROS）浓度；RT-PCR检测WNT5a基因表达；Western-blot法检测细胞核中非磷酸化β-catenin蛋白的数量变化。
结果 与空气组相比，氧体积分数0.4组在12H、24H存活率和凋亡率均无统计学差异，但48H后出现统计学差异，ROS在12H升高不明显，超过24H有统计学差异；氧体积分数＞0.95组每组均和空气组有统计学差异。WNT信号通路表达在12H以氧体积分数＞0.95组明显；24H空气组和氧体积分数0.4组升高，以氧体积分数0.4组最显著，氧体积分数＞0.95组表达下降；48H空气组达到高峰，其余两组下降。
结论 随着氧化应激时间的延长，即使较低浓度的氧刺激（40%）在超过48H以后也会出现相应的氧化损伤；氧体积分数越高WNT信号通路激活越快，但随着氧化应激时间的延长，WNT信号通路表达下降也越迅速。
