阿司匹林对原代培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞抗氧化损伤研究
钱明江1 陈淼1 高飞1 吴燕1 杨学忠1
遵义医学院附属医院重症医学科
目的 观察阿司匹林对原代培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（Alveolar epithelial type II cell，AEC-Ⅱ）的保护效应，探讨其抗氧化损伤的机制。
方法 将原代分离纯化培养的成年大鼠AEC-Ⅱ分为生理盐水组（NS组）、过氧化氢损伤组（H2O2组）、阿司匹林预处理1、2、3组（A1~3组）。A1~3组分别加入阿司匹林50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L预处理。NS组在培养40小时（h）后加入生理盐水，H2O2损伤组和A1~3组在培养40h后加入0.5mmol/L H2O2。3h后观察细胞形态学变化、贴壁细胞计数、检测细胞存活率。同时另外比较在无H2O2干预情况下NS组、A1~3组在培养20h、40h、60h 血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白及HO-1 mRNA在AEC-Ⅱ中的表达。
结果（1）胰蛋白酶消化、免疫粘附法可收获AEC-Ⅱ2~2.5×107个/鼠，纯度和活性＞90%。（2）与NS组比较，H2O2组细胞间隙增宽，贴壁细胞数量减少，细胞皱缩，细胞存活率明显下降；与H2O2组比较，A1~3组贴壁细胞数增多，细胞形态较完整，无明显细胞皱缩，A1~3组中细胞存活率明显增加（P＜0.05）。（3）与NS组比较，A1~3组HO-1蛋白及HO-1mRNA表达量明显增加（P＜0.05）。
结论（1）阿司匹林对离体培养氧化损伤的大鼠AEC-Ⅱ具有保护效应。（2）阿司匹林在离体培养的大鼠AEC-Ⅱ中，上调HO-1表达，HO-1可能是阿司匹林对离体培养大鼠氧化损伤的AEC-Ⅱ保护的重要调节因子。
方法 将原代分离纯化培养的成年大鼠AEC-Ⅱ分为生理盐水组（NS组）、过氧化氢损伤组（H2O2组）、阿司匹林预处理1、2、3组（A1~3组）。A1~3组分别加入阿司匹林50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L预处理。NS组在培养40小时（h）后加入生理盐水，H2O2损伤组和A1~3组在培养40h后加入0.5mmol/L H2O2。3h后观察细胞形态学变化、贴壁细胞计数、检测细胞存活率。同时另外比较在无H2O2干预情况下NS组、A1~3组在培养20h、40h、60h 血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白及HO-1 mRNA在AEC-Ⅱ中的表达。
结果（1）胰蛋白酶消化、免疫粘附法可收获AEC-Ⅱ2~2.5×107个/鼠，纯度和活性＞90%。（2）与NS组比较，H2O2组细胞间隙增宽，贴壁细胞数量减少，细胞皱缩，细胞存活率明显下降；与H2O2组比较，A1~3组贴壁细胞数增多，细胞形态较完整，无明显细胞皱缩，A1~3组中细胞存活率明显增加（P＜0.05）。（3）与NS组比较，A1~3组HO-1蛋白及HO-1mRNA表达量明显增加（P＜0.05）。
结论（1）阿司匹林对离体培养氧化损伤的大鼠AEC-Ⅱ具有保护效应。（2）阿司匹林在离体培养的大鼠AEC-Ⅱ中，上调HO-1表达，HO-1可能是阿司匹林对离体培养大鼠氧化损伤的AEC-Ⅱ保护的重要调节因子。
