从医院获得性肺炎患者呼吸道分离的耐碳青霉稀铜绿假单胞菌OprD的表达

吴大玮¹ 耿治英² 韩进³ 冯进波⁴
1. 山东大学齐鲁医院加强医疗科, 2. 东营市人民医院呼吸科, 3. 烟台市烟台山医院呼吸科, 4. 山东大学齐鲁医院心血管重构研究卫生部和教育部重点实验室

目的 研究耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单孢菌OprD的表达水平，探讨济南地区铜绿假单孢菌耐碳青霉烯类抗生素的机制。
方法 收集从医院获得性肺炎患者痰液中分离的铜绿假单孢菌，提取13株对碳青霉烯类抗生素耐药菌株的RNA , 应用荧光实时定量PCR分析铜绿假单孢菌oprD（外膜蛋白OprD的基因）表达水平。采用超声破碎法制备外膜蛋白，超速离心收集外膜蛋白，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离外膜蛋白，观察OprD的表达。
结果 荧光实时定量RT-PCR检测铜绿假单孢菌oprD表达的结果表明，实验室标准株Ct值的oprD/rpsL 为1.42。 13株碳青霉烯耐药株Ct值的oprD/rpsL 为1.17, s为0.0293，t=3.0716, p<0.005,与实验室标准株相比有显著性差异。2株碳青霉烯敏感株Ct值的oprD/rpsL 为1.58, s为0.31，t=0.516, p〉0.25, 与实验室标准株相比没有显著性差异。外膜蛋白电泳图谱表明，碳青霉烯耐药株在45 kDa处表达明显下降，此处外膜蛋白为OprD。
结论 济南地区铜绿假单孢菌耐碳青霉烯类抗生素与OprD的表达水平下降有关。