鼠肝缺血再灌注后肺组织ERK1/2通路活性变化及褪黑素的影响

姜春玲¹ 张卫星¹ 蔡文训¹ 朱仲生¹ 黄磊¹ 罗华¹
北京大学深圳医院ICU

目的 探讨大鼠全肝缺血再灌注后肺组织损伤、修复过程中ERK1/2信号通路活性的动态变化与意义，以及褪黑素对该信号通路的影响。
方法 本实验将分成两部分完成。第一部分， 36只SD大鼠随机分成6组（n=6)：①缺血前组;②再灌注0.5h组；③再灌注3h组；④再灌注6h组；⑤再灌注12h组；⑥再灌注24h组。阻断肝门30min后开放血流，建立大鼠全肝缺血再灌注模型。分别于缺血前5min、再灌注0.5h、3h、6h、12h、24h处死动物取肺，检测ERK1/2和p-ERK1/2表达，细胞凋亡，PCNA表达及肺组织病理学变化,观察肝缺血再灌注后肺组织ERK1/2信号通路活性的动态变化及其与细胞增殖、凋亡的关系。第二部分，将12只SD大鼠随机分成2组（n=6)：褪黑素组与基质对照组，依上述方法制备全肝缺血再灌注模型，分别于全肝缺血前15min和再灌注前10min静脉注射0.5％褪黑素溶液10mg/kg或相同剂量的溶剂，于再灌注3h处死动物取肺，检测前述相同参数，观察褪黑素的作用。
结果 （1）与缺血前相比，全肝缺血再灌注后肺组织p-ERK/ERK比值与PCNA阳性指数均于再灌注0.5h显著降低，此后逐渐增高；细胞凋亡指数则于再灌注0.5h显著增高，后逐渐上升，再灌注6h达最高，后又逐渐下降；肺组织病理于再灌注0.5h即出现损伤改变, 后逐渐加重，再灌注3h最重，此后逐渐恢复。（2）双变量相关分析显示：p-ERK/ERK比值与PCNA阳性指数成正相关（r=0.85，P＜0.01)；与凋亡指数呈负相关（r=-0.38，P＜0.05)。(3)褪黑素组与基质对照组比较，p-ERK/ERK比值显著增加，细胞凋亡指数显著降低,病理学改变减轻，但PCNA阳性指数无明显变化。
结论 全肝缺血再灌注后肺组织损伤、修复过程中，ERK1/2信号通路活性呈先抑制后激活的变化方式，该通路可能通过抑制凋亡、促进增殖在损伤肺组织自身修复过程中发挥积极作用。褪黑素可激活ERK1/2信号通路，并可能由此减轻肝缺血再灌注后肺损伤。