胸腺肽α1对脓毒症小鼠调节性T细胞的干预效应

万健¹ 单红卫¹ 赵良¹ 林兆奋¹ 单怡²
1. 上海长征医院急救科, 2. 306医院急诊科

目的 观察胸腺肽α₁对脓毒症小鼠调节性T细胞数量、比例、凋亡及生存率的影响，探求胸腺肽α₁免疫调节作用的新机制。
方法 SPF级KM雄性小鼠，按随机数字表法分为假手术组（Sham）、脓毒症组（CLP）和胸腺肽α₁干预组（Th）三组，每组按拟定标本采集时间再分随机分为2h、6h、12h、24h、48h、72h 6个亚组，每组20只小鼠（72h亚组30只）；以盲肠结扎穿孔术（CLP）制作脓毒症小鼠模型；Sham组不结扎盲肠，Th组于CLP术后腹部皮下注射胸腺肽α₁100μg·kg^-1；CLP组仅行盲肠结扎穿孔术。分别在预定时间点处死该亚组存活的小鼠并采集全血、远端回肠等标本；流式细胞仪检测血中CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺T细胞（Treg）计数及其占CD4⁺T细胞的百分比、CD4⁺CD25⁺T细胞凋亡率，ELISA法测定血清细胞因子TNF-α、IL-2、IL-10和TGF-β的浓度，苏木素-伊红（HE）染色光镜检测回肠病理形态变化，并对72h亚组进行生存率计算。用SPSS14.0 for Windows软件对数据作统计分析。
结果 Th组72h生存率明显高于CLP组（P=0.0184）。流式细胞术检测显示，Sham组术后Treg几无变化；Th组术后各时间点血中Treg占CD4⁺T细胞的比例均明显低于CLP组（P<0.05或P<0.01）；相反地，Th组CD4⁺CD25⁺T细胞的凋亡率显著高于CLP组（P<0.01）；术后6～24h时间段CLP组CD4⁺CD25⁺T细胞的凋亡率甚至低于Sham组（P<0.05或P<0.01）。三组术后血清细胞因子IL-2、TNF-α和IL-10、TGF-β均有变化，但Sham组变化幅度最小；与CLP组相比，Th组术后IL-2、TNF-α前期上升较小，后期降幅也小（P<0.01），而IL-10、TGF-β虽然也呈持续升高走势，但其升高幅度显著低于CLP组（P<0.01）。组织形态学检测显示相同时间点上Th组远端回肠的病理损害明显比CLP组减轻。
结论 胸腺肽α₁能有效调控脓毒症小鼠的炎症反应强度，提高72小时生存率。促进Treg的凋亡，降低脓毒症小鼠血中Treg的比例，可能是胸腺肽α₁发挥免疫调理作用的又一重要机制。