机械牵张通过丝裂原活化蛋白激酶激酶6诱导肺泡上皮细胞表达高迁移率族蛋白B1

丁宁¹
广州市第一人民医院麻醉科

目的　探讨丝裂原活化蛋白激酶激酶6 (mitogen-activated protein kinase kinase 6, MKK6)在机械牵张诱导肺泡上皮细胞(A549)表达高迁移率族蛋白B1 (high mobility group box 1 protein, HMGB1) 中的作用。方法A549细胞分为5组，分别为正常对照组、转染空腺病毒载体(ad.RSV)细胞组、转染野生型MKK6细胞组、转染MKK6的组成性活性突变体MKK6(E)细胞组和转染MKK6的显性无活性突变体MKK6(A)细胞组，各组细胞又分为施加牵张(20%)组和未施加牵张组。应用荧光显微镜和Western blot方法观察转染基因的表达情况；用激酶活性测定法检测细胞内MKK6的激酶活性；用Western blot和RT-PCR检测各组细胞HMGB1蛋白和mRNA的表达。结果　机械牵张可明显诱导A549细胞MKK6激活及HMGB1表达增加（P<0.05），MKK6活性突变体也可明显诱导A549细胞HMGB1表达增加（P<0.05），而MKK6无活性突变体则明显抑制机械牵张诱导HMGB1的表达（P<0.05）。结论 机械牵张通过MKK6诱导A549细胞表达HMGB1。